Молекулярная диагностика 2018 в Беларуси
(бесплатно для звонков по РФ) 8 (800) 100-28-84

Поиск по сайту

Каталог Партнеры Акции Новости О компании Контакты

Цифровая ПЦР - современная альтернатива ПЦР в реальном времени

Метод проведения ПЦР с регистрацией результатов в реальном времени (количественная ПЦР, qPCR, real-time PCR) для количественного определения фрагментов ДНК в образце прочно закрепился в практике лабораторных и научных исследований.

Современным альтернативным методом для решения подобных задач является цифровая ПЦР.

Отличие ПЦР в реальном времени от цифровой

A29738.jpg

В отличие от стандартной количественной ПЦР, которая проходит в едином реакционном объеме, для проведения цифровой ПЦР пробу при помощи специального прибора случайным образом разделяют на большое количество изолированных микрокомпартментов, так называемых микрореакторов. 

В каждый микрореактор попадают специфичные к ДНК-мишени праймеры и TaqMan- зонды или флуоресцентный краситель SYBR Green, а также целевые или фоновые фрагменты ДНК. 

Далее, проводится термоциклирование образца и полимеразно-цепная реакция проходит только в тех ячейках, куда попала ДНК-мишень. Это приводит к возникновению в них флуоресцентного сигнала, который регистрируется при помощи специализированной системы – ридера.

Цифровая ПЦР с системой QuantStudio™ 3D от компании Thermo Fisher Scientific

Определение количества ДНК-мишени при помощи системы для проведения цифровой ПЦР QuantStudio™ 3D проводится без использования калибровочной кривой (без использования стандартов), вид которой сильно зависит от условий проведения ПЦР. Вследствие этого значительно возрастает устойчивость реакционной системы к ингибиторам ПЦР и воспроизводимость результатов.

Система для проведения цифровой ПЦР QuantStudio™ 3D позволяет детектировать единичные молекулы ДНК-мишени даже при низкой её концентрации в образце. Благодаря тому, что ПЦР проходит только в той ячейке, где есть ДНК-мишень, разбавление образца улучшает «чистоту» сигнала (увеличивается соотношение сигнал/шум).

Области применения цифровой ПЦР:

  • обнаружение редких мутаций (от 0,025% до 0,01% представленности в образце);
  • определение вариаций числа копий гена;
  • обнаружение химеризма;
  • чувствительная детекция уровня экспрессии генов, кодирующих белки и малые некодирующие РНК;
  • абсолютное определение вирусной нагрузки.
Подробнее о системе QuantStudio™ вы можете узнать в разделе Цифровая ПЦР в каталоге нашего сайта.

Видеообзор технологии и областей применения цифровой ПЦР с системой QuantStudio™ 3D Digital PCR System (Thermo Fisher Scientific) 


Подробнее о составляющих системы QuantStudio™ 3D Digital PCR System в каталоге

 

Кат. номер

Наименование

A29738

Система для проведения цифровой ПЦР QuantStudio™ 3D

4489084

Прибор для чтения чипов QuantStudio 3D Digital PCR Instrument

4482592

Загрузчик чипов QuantStudio 3D Digital PCR Chip Loader

4484078

Амплификатор с термоблоком для чипов ProFlex 2 x Flat PCR System

4485513

Набор адаптеров для чипов QuantStudio 3D Digital PCR Chip Adapter Kit

A24898

Принадлежности для наклонного размещения амплификатора ProFlex QuantStudio 3D Digital PCR Tilt Base

4484074

Термоблок для амплификатора ProFlex под чипы QuantStudio 3D

A28598

Беспроводной Wi-Fi-адаптер для системы для цифровой ПЦР QuantStudio™ 3D