Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в настоящее время является наиболее совершенным диагностическим методом, позволяющим выявлять единичных возбудителей многих инфекционных заболеваний за счет многократного увеличения количества копий тестируемых специфических последовательностей ДНК.

Наборы реагентов «АмплиСенс» (устаревшее название - тест-системы), основаны на принципе амплификации ДНК и позволяют обнаруживать патогенные для человека бактерии и вирусы даже в тех случаях, когда другими способами (иммунологическим, бактериологическим, микроскопическим) их выявление невозможно.

Это преимущество достигается за счет высокой чувствительности  наборов реагентов «АмплиСенс», которая составляет около 10 бактериальных клеток, в то время как чувствительность и монологических и микроскопических тестов колеблется в пределах 1000-1000000 клеток.

Наборы «АмплиСенс» на основе ПЦР эффективны при диагностике трудно культивируемых, не культивируемых и персистирующих форм патогенных бактерий. С этим приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, а также при исследовании  объектов внешней среды. Наборы «АмплиСенс» позволяют избежать основных трудностей, связанных  с неспособностью таких бактерий размножаться в лабораторных условиях. При ПЦР-диагностике размножению подлежит не бактерия, а только ее ДНК, причем не вся молекула ДНК, а только определенный фрагмент, являющийся маркером данного возбудителя.

Наборы реагентов «АмплиСенс», в отличие от иммунологических тест-систем, позволяют избежать проблем, связанных с перекрестно-реагирующими антигенами, тем самым обеспечивая абсолютную специфичность.

Определение можно проводить непосредственно в клиническом материале (кровь, сыворотка, лаважные массы, мокрота, слюна,  желудочный сок,  биопсийный материал, мазки, смывы), в продуктах питания  и в материале, получаемом из объектов внешней среды (вода, почва).

ПЦР - метод молекулярной диагностики, ставший для ряда инфекций «золотым стандартом», проверен временем и тщательно апробирован клинически.

Диагностика методом ПЦР на наборах реагентов «АмплиСенс» имеет следующие преимущества:

  • Метод прямой и позволяет достичь предельно возможной чувствительности: от нескольких копий до одного возбудителя в пробе.
  • Специфичность метода равна 100%.
  • Для ПЦР-анализа пригоден любой материал, в том числе и гистологические препараты.
  • Количество исследуемого материала, как правило, составляет несколько десятков микролитров.
  • Метод позволяет определять число копий возбудителя в пробе и тем самым контролировать виремию или бактеремию в процессе лечения.
  • Простота исполнения и возможность полной автоматизации.
  • Результаты получают через несколько часов, то есть в течение одного рабочего дня.
Типы, форматы и комплектации наборов реагентов «АмплиСенс» для ПЦР-диагностики

Метод детекции: - FRT; - FEP; - ЭФ; - ГИФА
Комплектация: – набор реагентов полной комплектации, включает реагенты для всех этапов ПЦР-анализа;
– набор реагентов, включает только комплект для одного этапа анализа
Фасовка: – готовые ПЦР-пробирки с нижней реакционной смесью под слоем воска;
– флаконы с реагентами, не разнесенными по ПЦР-пробиркам;
– флаконы с реагентами, не разнесенными по ПЦР-пробиркам

  Набор реагентов полной комплектации
включает реагенты для всех этапов ПЦР-анализа (выделение ДНК(РНК), обратная транскрипция (для РНК-содержащих инфекционных агентов), амплификация, детекция)

  Электрофоретическая детекция продуктов ПЦР (ЭФ)
МаркировкаКол-во тестов,
тип пробирок
Приборная база детекцииОписаниеCостав
Т**-100-R0,5100 тестов,
пробирки 0,5мл
Аппарат для горизонтального электрофореза, УФ-трансиллюминаторРазделение продуктов амлификации в агарозном геле с использованием интеркалирующего красителявключает 3 или 4 комплекта реагентов:
1. Для выделения нуклеиновых кислот;
2. Для обратной транскрипции (ОТ) - только для РНК-содержащих вирусов
3. Для амплификации ДНК (кДНК)
4. Для проведения электрофореза в агарозном геле
Т**-100-R0,2100 тестов,
пробирки 0,2мл
  Гибридизационно-флуоресцентная детекция - анализ по «конечной точке», FRT - Fluorescence detection with End Point analysis
МаркировкаКол-во тестов,
тип пробирок
Приборная база детекцииОписаниеCостав
T**-100-R0,5-FEP100 тестов,
пробирки 0,5мл
Флуоресцентный ПЦР-детектор: AЛA-1/4 (BioSan, Латвия), «Джин» («ДНК-технология», Россия)Измерение уровня флуоресцентного сигнала по окончании ПЦРвключает 2 или 3 комплекта реагентов:
1. Для выделения нуклеиновых кислот;
2. Для обратной транскрипции (ОТ) - только для РНК-содержащих вирусов
3. Для амплификации ДНК (кДНК) с флуоресцентными зондами
T**-100-R0,2-FEP100 тестов,
пробирки 0,2мл
T**-50-R0,5-FEP50 тестов, пробирки 0,5мл
T**-50-R0,2-FEP50 тестов, пробирки 0,2мл
  Анализ в режиме реального времени (Real-time PCR), FEP - Fluorescence Real-Time detection
МаркировкаВариантПриборная база детекцииОписаниеCостав
TR-**- T(хх)Количественный анализ - ТИТРТермоциклер с системой детекции флуоресцентного сигнала в режиме реального времениИзмерение флуоресцентного сигнала в процессе ПЦР в режиме реального временивключает 2 или 3 комплекта реагентов:
1. Для выделения нуклеиновых кислот;
2. Для обратной транскрипции (ОТ) - только для РНК-содержащих вирусов
3. Для амплификации ДНК (кДНК) в режиме реального времени
TR-**- М(хх)Количественный анализ МОНИТОР
TR-**- (RG)Rotor-Gene («Corbett Research», Австралия)
TR-**- (iQ)iQ iCycler («Bio-Rad», США)
TR-**- (SC)SmartCycler («Cepheid», США)
TR-**- (Mx)Mx3000P («Strategene», США)
  Метод ГиФА
Вариант методаМаркировкаТип пробирокВариантПриборная базаСостав
Учет результатов методом ГиФАTH-**-G-R0,5пробирки 0,5млКачественный анализМикропланшетный ридер и термостат для планшетвключает 3 или 4 комплекта реагентов:
1. для выделения нуклеиновых кислот;
2. Для обратной транскрипции (ОТ) - только для РНК-содержащих вирусов
3. для амплификации ДНК (кДНК)
4. для детекции продуктов ПЦР методом ГиФА
TH-**-G-R0,2пробирки 0,2мл
TH-**- M 
Количественный анализ
Иммуносорбция и учет результатов методом ГиФАTH-**-S-R0,5пробирки 0,5млКачественный анализ
TH-**-S-R0,2пробирки 0,2мл

  Набор реагентов для этапа амплификации
включают только реагенты для амплификации или для обратной транскрипции (ОТ) и амплификации

  Электрофоретическая детекция продуктов ПЦР (ЭФ)
МаркировкаКол-во тестов, тип пробирокПриборная база детекцииОписание
**-200220 тестов (не расфасовано по пробиркам)Aппарат для горизонтального электрофореза, УФ-трансиллюминаторРазделение продуктов амлификации в агарозном геле с использованием интеркалирующего красителя
**-100-R0,5110 тестов, пробирки 0,5мл
**-100-R0,2110 тестов, пробирки 0,2мл
  Гибридизационно-флуоресцентная детекция - анализ по «конечной точке», FEP - Fluorescence detection with End Point analysis
МаркировкаКол-во тестов, тип пробирокПриборная база детекцииОписание
**-100-R0,5-FEP100 тестов, пробирки 0,5млФлуоресцентный ПЦР-детектор: AЛA-1/4 (BioSan, Латвия), «Джин» («ДНК-технология», Россия)Измерение уровня флуоресцентного сигнала по окончании ПЦР
**-100-R0,2-FEP100 тестов, пробирки 0,2мл
**-50-R0,5-FEP50 тестов, пробирки 0,5мл
**-50-R0,2-FEP50 тестов, пробирки 0,2мл
  Анализ в режиме реального времени (Real-time PCR), FRT - Fluorescence Real-Time detection
МаркировкаПриборная база детекцииОписание
 
Термоциклер с системой детекции флуоресцентного сигнала в режиме реального времениИзмерение флуоресцентного сигнала в процессе ПЦР в режиме реального времени
R-**- (RG)Rotor-Gene Q(«QIAGEN», Германия)
R-**- (iQ)iQ iCycler («Bio-Rad», США)
R-**- (SC)SmartCycler («Cepheid», США)
R-**- (Mx)Mx3000P («Strategene», США)

** - индивидуальная маркировка в соответствии с выявляемым возбудителем.
Реагенты для обратной транскрипции включаются в состав набора только в случае выявления РНК-содержащих вирусов