Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в настоящее время является наиболее совершенным диагностическим методом, позволяющим выявлять единичных возбудителей многих инфекционных заболеваний за счет многократного увеличения количества копий тестируемых специфических последовательностей ДНК.
Наборы реагентов «АмплиСенс» (устаревшее название - тест-системы), основаны на принципе амплификации ДНК и позволяют обнаруживать патогенные для человека бактерии и вирусы даже в тех случаях, когда другими способами (иммунологическим, бактериологическим, микроскопическим) их выявление невозможно.
Это преимущество достигается за счет высокой чувствительности наборов реагентов «АмплиСенс», которая составляет около 10 бактериальных клеток, в то время как чувствительность и монологических и микроскопических тестов колеблется в пределах 1000-1000000 клеток.
Наборы «АмплиСенс» на основе ПЦР эффективны при диагностике трудно культивируемых, не культивируемых и персистирующих форм патогенных бактерий. С этим приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, а также при исследовании объектов внешней среды. Наборы «АмплиСенс» позволяют избежать основных трудностей, связанных с неспособностью таких бактерий размножаться в лабораторных условиях. При ПЦР-диагностике размножению подлежит не бактерия, а только ее ДНК, причем не вся молекула ДНК, а только определенный фрагмент, являющийся маркером данного возбудителя.
Наборы реагентов «АмплиСенс», в отличие от иммунологических тест-систем, позволяют избежать проблем, связанных с перекрестно-реагирующими антигенами, тем самым обеспечивая абсолютную специфичность.
Определение можно проводить непосредственно в клиническом материале (кровь, сыворотка, лаважные массы, мокрота, слюна, желудочный сок, биопсийный материал, мазки, смывы), в продуктах питания и в материале, получаемом из объектов внешней среды (вода, почва).
ПЦР - метод молекулярной диагностики, ставший для ряда инфекций «золотым стандартом», проверен временем и тщательно апробирован клинически.
Диагностика методом ПЦР на наборах реагентов «АмплиСенс» имеет следующие преимущества:
- Метод прямой и позволяет достичь предельно возможной чувствительности: от нескольких копий до одного возбудителя в пробе.
- Специфичность метода равна 100%.
- Для ПЦР-анализа пригоден любой материал, в том числе и гистологические препараты.
- Количество исследуемого материала, как правило, составляет несколько десятков микролитров.
- Метод позволяет определять число копий возбудителя в пробе и тем самым контролировать виремию или бактеремию в процессе лечения.
- Простота исполнения и возможность полной автоматизации.
- Результаты получают через несколько часов, то есть в течение одного рабочего дня.
| Метод детекции: |  - FRT;  - FEP;  - ЭФ;  - ГИФА |
| Комплектация: |  – набор реагентов полной комплектации, включает реагенты для всех этапов ПЦР-анализа;
 – набор реагентов, включает только комплект для одного этапа анализа |
| Фасовка: |  – готовые ПЦР-пробирки с нижней реакционной смесью под слоем воска;
 – флаконы с реагентами, не разнесенными по ПЦР-пробиркам;
 – флаконы с реагентами, не разнесенными по ПЦР-пробиркам |
Набор реагентов полной комплектации
включает реагенты для всех этапов ПЦР-анализа (выделение ДНК(РНК), обратная транскрипция (для РНК-содержащих инфекционных агентов), амплификация, детекция)
| Электрофоретическая детекция продуктов ПЦР (ЭФ) | ||||
| Маркировка | Кол-во тестов,
тип пробирок | Приборная база детекции | Описание | Cостав |
| Т**-100-R0,5 | 100 тестов,
пробирки 0,5мл | Аппарат для горизонтального электрофореза, УФ-трансиллюминатор | Разделение продуктов амлификации в агарозном геле с использованием интеркалирующего красителя | включает 3 или 4 комплекта реагентов:
1. Для выделения нуклеиновых кислот; 2. Для обратной транскрипции (ОТ) - только для РНК-содержащих вирусов 3. Для амплификации ДНК (кДНК) 4. Для проведения электрофореза в агарозном геле |
| Т**-100-R0,2 | 100 тестов,
пробирки 0,2мл | |||
| Гибридизационно-флуоресцентная детекция - анализ по «конечной точке», FRT - Fluorescence detection with End Point analysis | ||||
| Маркировка | Кол-во тестов,
тип пробирок | Приборная база детекции | Описание | Cостав |
| T**-100-R0,5-FEP | 100 тестов,
пробирки 0,5мл | Флуоресцентный ПЦР-детектор: AЛA-1/4 (BioSan, Латвия), «Джин» («ДНК-технология», Россия) | Измерение уровня флуоресцентного сигнала по окончании ПЦР | включает 2 или 3 комплекта реагентов:
1. Для выделения нуклеиновых кислот; 2. Для обратной транскрипции (ОТ) - только для РНК-содержащих вирусов 3. Для амплификации ДНК (кДНК) с флуоресцентными зондами |
| T**-100-R0,2-FEP | 100 тестов,
пробирки 0,2мл | |||
| T**-50-R0,5-FEP | 50 тестов, пробирки 0,5мл | |||
| T**-50-R0,2-FEP | 50 тестов, пробирки 0,2мл | |||
| Анализ в режиме реального времени (Real-time PCR), FEP - Fluorescence Real-Time detection | ||||
| Маркировка | Вариант | Приборная база детекции | Описание | Cостав |
| TR-**- T(хх) | Количественный анализ - ТИТР | Термоциклер с системой детекции флуоресцентного сигнала в режиме реального времени | Измерение флуоресцентного сигнала в процессе ПЦР в режиме реального времени | включает 2 или 3 комплекта реагентов:
1. Для выделения нуклеиновых кислот; 2. Для обратной транскрипции (ОТ) - только для РНК-содержащих вирусов 3. Для амплификации ДНК (кДНК) в режиме реального времени |
| TR-**- М(хх) | Количественный анализ МОНИТОР | |||
| TR-**- (RG) | Rotor-Gene («Corbett Research», Австралия) | |||
| TR-**- (iQ) | iQ iCycler («Bio-Rad», США) | |||
| TR-**- (SC) | SmartCycler («Cepheid», США) | |||
| TR-**- (Mx) | Mx3000P («Strategene», США) | |||
| Метод ГиФА | |||||
| Вариант метода | Маркировка | Тип пробирок | Вариант | Приборная база | Состав |
| Учет результатов методом ГиФА | TH-**-G-R0,5 | пробирки 0,5мл | Качественный анализ | Микропланшетный ридер и термостат для планшет | включает 3 или 4 комплекта реагентов:
1. для выделения нуклеиновых кислот; 2. Для обратной транскрипции (ОТ) - только для РНК-содержащих вирусов 3. для амплификации ДНК (кДНК) 4. для детекции продуктов ПЦР методом ГиФА |
| TH-**-G-R0,2 | пробирки 0,2мл | ||||
| TH-**- M | Количественный анализ | ||||
| Иммуносорбция и учет результатов методом ГиФА | TH-**-S-R0,5 | пробирки 0,5мл | Качественный анализ | ||
| TH-**-S-R0,2 | пробирки 0,2мл | ||||
Набор реагентов для этапа амплификации
включают только реагенты для амплификации или для обратной транскрипции (ОТ) и амплификации
| Электрофоретическая детекция продуктов ПЦР (ЭФ) | |||
| Маркировка | Кол-во тестов, тип пробирок | Приборная база детекции | Описание |
| **-200 | 220 тестов (не расфасовано по пробиркам) | Aппарат для горизонтального электрофореза, УФ-трансиллюминатор | Разделение продуктов амлификации в агарозном геле с использованием интеркалирующего красителя |
| **-100-R0,5 | 110 тестов, пробирки 0,5мл | ||
| **-100-R0,2 | 110 тестов, пробирки 0,2мл | ||
| Гибридизационно-флуоресцентная детекция - анализ по «конечной точке», FEP - Fluorescence detection with End Point analysis | |||
| Маркировка | Кол-во тестов, тип пробирок | Приборная база детекции | Описание |
| **-100-R0,5-FEP | 100 тестов, пробирки 0,5мл | Флуоресцентный ПЦР-детектор: AЛA-1/4 (BioSan, Латвия), «Джин» («ДНК-технология», Россия) | Измерение уровня флуоресцентного сигнала по окончании ПЦР |
| **-100-R0,2-FEP | 100 тестов, пробирки 0,2мл | ||
| **-50-R0,5-FEP | 50 тестов, пробирки 0,5мл | ||
| **-50-R0,2-FEP | 50 тестов, пробирки 0,2мл | ||
| Анализ в режиме реального времени (Real-time PCR), FRT - Fluorescence Real-Time detection | |||
| Маркировка | Приборная база детекции | Описание | |
| Термоциклер с системой детекции флуоресцентного сигнала в режиме реального времени | Измерение флуоресцентного сигнала в процессе ПЦР в режиме реального времени | ||
| R-**- (RG) | Rotor-Gene («Corbett Research», Австралия) | ||
| R-**- (iQ) | iQ iCycler («Bio-Rad», США) | ||
| R-**- (SC) | SmartCycler («Cepheid», США) | ||
| R-**- (Mx) | Mx3000P («Strategene», США) | ||
** - индивидуальная маркировка в соответствии с выявляемым возбудителем.
Реагенты для обратной транскрипции включаются в состав набора только в случае выявления РНК-содержащих вирусов
RSS
